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慢病毒包装步骤

1.重组慢病毒的制备Day1:汇合度90%的10cmdishsHEK293T细胞（~6×107/dish）按1：1比例传代至15cmdishs，第二天细胞汇合度达到90%-95%（~1.5×108/dish），培养基为Gibico高糖DMEM培养基（含10%FBS）。Day2:转染前2-3个小时更换培养基（含10%FBS)；2)按照以下比例配制转染试剂：Mix1体积μlMix2量DMEM（无FBS）1000μlDMEM（无FBS）1000μl目的基因质粒25μgVGF190μ...

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病毒实验原理和慢病毒包装系统介绍

慢病毒是一种有包膜的RNA病毒，直径为80-120nm，呈二十面体对称结构、球形。病毒颗粒最外层是包膜(包膜蛋白决定了感染细胞的类型)，再往里依次为基质蛋白和衣壳，最里面是两条相同的正股RNA链和酶(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒实验原理慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种，基因组为双链RNA。但区别于一般的逆转录病毒，慢病毒具有更广的宿主范围，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。重组慢病毒载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的工具载体，...

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搅拌罐生物反应器培养贴壁细胞如何选择微载体

微载体能够在搅拌罐生物反应器中培养贴壁细胞。然而，不存在用于微载体选择的稳健、可转移的方法，研究提供很少或没有解释为什么使用微载体的原因。我们系统地评估了来自三个供体的用于人骨髓来源的MSC(hBM-MSCs)扩增的13种微载体，以建立一种可重现和可转移的微载体选择方法。单层研究证明了输入细胞系在生长动力学和代谢物通量方面的变异性。与hBM-MSC2和hBM-MSC3相比，HBM-MSC1在三个传代中经历了更多的累积群体倍增。在100mL转瓶中，搅拌条件明显优于静态条件，与供...

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细胞培养过程中细胞质控方案

正如人有喜怒哀乐，细胞也是如此，细胞的活力和状态是不断变化的，而非一成不变的。在细胞体外培养的过程中，离开机体保护的细胞是很脆弱的，在陌生的生长环境下即便是培养条件的轻微改变，也可能对细胞产生无法预估的影响。在原代细胞培养过程中，即使保持培养条件一致，在传代过程中，细胞的存活质量也是逐渐下降的。以人脐静脉内皮细胞（HUVEC细胞）为例，HUVEC细胞是研究内皮细胞功能的经典体外细胞模型。在心血管疾病的研究中，主要用于研究内皮细胞功能改变或损伤后其衍生细胞因子对血压的影响；在肿...

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生育研究新途径-科学家利用 2 只雄性细胞制造小鼠

近期，科学家们从两只雄性小鼠中培育出幼鼠。这提高了将同样的技术用于人类的可能性——尽管专家警告说，很少有小鼠胚胎发育成活的小鼠幼崽，而且没有人知道它是否适用于人类。尽管如此，“这是一个非常聪明的策略，”加州大学旧金山分校的干细胞和生殖专家DianaLaird说，她没有参与这项研究?！罢馐歉上赴蜕成镅У闹匾徊??！薄笨蒲Ъ颐窃谥苋⒈碓凇蹲匀弧吩又旧系囊幌钛芯恐忻枋隽怂堑墓ぷ鳌Ｊ紫龋谴有坌孕∈蟮奈舶蜕咸崛∑し粝赴?，并将其转化为“诱导性多能干细胞”，这些细胞可以发育成...

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