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2024-429
微生物是发酵工业的灵魂,对微生物控制的发酵过程进行优化,我们要了解发酵罐中微生物的生长反应特性。微生物细胞生长是细胞个体内许多化学反应的综合结果。这些反应包括合成提供其它反应需要的吉布斯自由能;利用底物合成结构单元,再聚合成大分子物质,供合成细胞所需等。正常情况下,微生物细胞为了确保有序和高效生长,必须将这些反应有机地结合在一起,经济地分配胞内各代谢途径的通量。大肠杆菌是发酵研究中用得最多的微生物。在大肠杆菌生长过程中前人已观察到下列现象∶(1)在大肠杆菌快速生长期间,生物合...
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2024-429
[实验原理]当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法,电穿孔已被广泛用于各种细胞类型,包括细菌、酵母、植物和动物细胞;而且,它还能作为注射方法(称为电注射),把各种外源物质引入活细胞。与其他常用的导入外源物质的方法相比,电穿孔具有很多优点。一.不必象显微镜那样使用玻璃针,不需要技术培训和昂贵的设备,可以一次对成百万...
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2024-429
内毒素去除方法概述内毒素是存在于革兰氏阴性细菌外膜中的致病因子,具有较好的耐热性和稳定性,对人体健康有着不可忽视的危害。本文将概述内毒素的成分和特性,并讨论了目前常见的内毒素去除方法包括超滤去除法、活性炭法、表面活性剂萃取、强酸强碱、层析法等。同时还分析了各种方法的优缺点以及在工业生产中的应用前景。一、超滤去除法和活性炭法内毒素由多糖O抗原、核心多糖和类脂A等组成,作为细菌外膜的主要结构成分,不易被化学药品破坏。为了有效去除内毒素,可以采用多种方法。超滤去除法通过使用孔径适当...
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2024-429
【实验原理】磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法。磷酸钙有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞,被转染的DNA可以在细胞内进行瞬时表达,也可整合到靶细胞的染色体上从而产生不同基因型和表型的稳定克隆。该方法可广泛用于转染许多不同类型的细胞。细胞转染试剂【仪器、材料和试剂】(一)仪器、用具CO2培养箱[1]、10cm细胞培养平板、巴斯德吸管、微量移液器[2]、15ml锥形管、烧杯、量筒...
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2024-428
CRISPR/Cas(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats/CRISPR-associatedprotein)系统是当前先进的基因编辑技术之一。该技术因其高效、精确和相对容易操作的特点,在生物医学、农业、生物技术等领域获得了广泛的应用。CRISPR/Cas系统主要包含两个部分:一个能够识别目标DNA序列的导向RNA(gRNA)和一个能够切割DNA的Cas蛋白。通过设计特定的gRNA来引导Cas蛋白到特定的DN...
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