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2023-26
核酸提取试剂盒的工作原理子生物学实验中qPCR、分子克隆、下一代测序等都需要进行DNA提取。如今,大多数实验室都使用商业DNA提取试剂盒,这些试剂盒使用硅胶自旋过滤法来获得高质量的DNA。这些可以快速有效地纯化DNA(或RNA),在这里需要先了解一下DNA提取试剂盒的工作原理。核酸提取试剂盒的工作原理离心柱包含一种硅胶树脂,可根据盐条件和受提取方法影响的其他因素选择性地结合DNA和RNA。这些DNA提取试剂盒使整个过程比旧的DNA分离方法更容易、更快。但是,使用套件的缺点是,...
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2023-26
分子生物中RNA和DNA提取会常常遇到一些问题,下面小编就RNA和DNA提取实验中的通常遇到的几个问题进行解析。1.提取产量低如果您遇到的DNA/RNA产量低于您对样品的预期,则需要考虑许多因素。通常,这是一个裂解问题。未裂解是产量低的主要原因。它也可能是由不正确的绑定条件引起的。确保使用新鲜的优质乙醇(100%200标准)稀释缓冲液或添加到结合的步骤。劣质乙醇或旧库存可能已经吸收了水分,并且浓度不正确。如果洗涤缓冲液制备不正确,您可能正在洗掉提取的DNA或RNA。2.提取低...
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2023-26
病原微生物实验操作规范病原微生物接种的操作规范:做到以下4点能较大限度地减少接种时气溶胶的产生。1.打开菌种管时,将安瓿管颈部烧热,用冷的湿棉球使之突然破裂,才可以大大减小溶胶的产生。2.划板时,琼脂平板要选用表面光滑的;接种环应用弹性小的金属丝制作,丝杆要短,环不宜过大,划板动作要轻。3.接完种后,蘸有菌液的接种环应在含有消毒液的毛巾上吸干后再放到火焰上灼烧到红。4.混匀微生物悬液的时候,旋转式摇动,不能左右摇动;摇动时动作轻柔不要使悬液弄湿试管塞。生物样本移液操作规范生物...
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2023-26
生命科学研究时生物学的分支,下面介绍几个关于生命科学常用的几种实验方法:一、BCA法测蛋白质浓度实验原理:BCA(bicinchoninicacid,二辛可酸)法测定蛋白质即在碱性条件下蛋白质与Cu2+络合,并将其还原成Cu1+。Cu1+和BCA试剂反应使其由原来的苹果绿形成稳定的紫蓝色复合物,在562nm有强烈的光吸收,且吸光值和蛋白质浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此可用于蛋白质浓度测定。二、免疫组化原理:免疫组织化学,即免疫组化,是应用免疫学基本原理一-抗原抗体反应...
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2023-23
实时荧光定量PCR,简称RT-QPCR,属于Q-PCR的一种,目前该技术已得到广泛应用,如:扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等。荧光定量PCR常用的方法是DNA结合染料SYBRGreenⅠ的非特异性方法和Taqman水解探针的特异性方法。SYBRGreenI是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料,可与所有的各种序列的双链DNA分子结合。在游离状态下,SYBRGreenI发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合,嵌入至dsDNA,荧...
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