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2023-23
细胞调亡是细胞主动死亡的过程，并出现一系列特征变化。包括核固缩、核碎裂、凋亡小体形成，以及DNA特征性片段化、新的基因表达和特定的生物大分子合成等。流式细胞仪可以对不同细胞凋亡的过程进行定性和定量检测，通过检测细胞膜完整性来反应细胞凋亡是常用的流式检测细胞凋亡常用方法之一。其原理是：①用AnnexinV检测早期凋亡细胞：AnnexinV可以结合细胞膜上的磷酯酰丝氨酸，磷酯酰丝氨酸位于正常细胞膜内侧，不会被检测到，凋亡时外翻到细胞膜外表面，可以被检测到。②用PI或者7AAD检测...
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CCK-8法进行细胞毒性检测的方法CCK-8法是细胞活力和细胞毒性检测常用的一种检测方法，其具体操作方法如下：1.制备细胞悬液：选取生长状态良好的对数生长期细胞制作细胞悬液，并计数。2.在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。3.将培养板置于培养箱中预培养（37℃，5%CO2）12-24小时，使细胞达到指数期（培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异）。4.吸出各孔培养基，向培养板加入10μL不同浓度的待测药物进行干预。（实验组加入含不同浓度药物的培养基，空白...
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CCK-8细胞活性检测实验步骤CCK-8实验可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。使用酶标仪在450nm波长处测OD值，可间接性反应活细胞的数量。使用CCK-8试剂盒进行细胞活性检测是一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。CCK-8细胞活性检测实验步骤：一、实验前准备：酒精灯、移液枪、酶标仪（带有450nm滤光片）、96孔培养板、CO2培养箱、CCK-8、细胞计数板、PBS等。二、绘制曲线1....
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CHO细胞外泌体的分离和表征CHO细胞是一种广泛用于生物制药蛋白质生产的宿主。CHO细胞中分离外泌体主要采用聚合物的沉淀(PBP)技术从分批培养中分离和富集细胞外泌体囊泡。分离后的外泌体可以通过多种方法来检测和表征分离的囊泡，这些分析包括动态光散射(DLS)和Zeta电位测量、电子显微镜(EM)和外泌体标记物分析、RNA和脂质分析等。一、细胞培养1.培养基与细胞细胞可使用CHO系中的CHO-S细胞。培养基使用CD-CHO培养基（ThermoFisher）。在培养基中添加8mM...
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如何选择移液枪移液吸头如何选择实验室移液吸头?任何移液器，其性能和精确度都会因使用质量不佳或不合适的吸头而受到严重影响。移液器和移液器吸头作为一个系统，只有互相匹配才能保证准确地转移和输送液体。在掌握正确的移液技术后，匹配推荐的吸头，就能保证移液的精度。一般分为：①袋装吸头、②盒装吸头、③低吸附吸头、④滤芯吸头、⑤自动化吸头等。透明吸头VS.有色吸头当前，市场上吸头基本上都是用聚丙烯塑料（化学惰性高，使用温度范围广的无色透明塑料）做的。不过，同样是聚丙烯，品质差别也会很大：高...
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