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如何选购合适的PCR耗材

如何选购合适的PCR耗材PCR耗材包括PCR管(EP管）、8连排管、96孔PCR板、深孔板等这些材质一般为聚丙烯PP材质，具有高品质、高纯度、高透明的特点，一般都在洁净空间生产加工。PCR耗材为什么一般都是PP材质的呢，为什么需要环境洁净？因为PCR/qPCR耗材通?；嵊胧约粱蜓分苯咏哟ィ郾≒P）材质是生物学惰性材料，表面不易于粘附生物分子，且有着良好的化学耐性，及温度耐受性（可以121℃高压灭菌，也可以承受热循环过程中的温度变化）。这里强调一下耗材质量（是否干净）...

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实时定量PCR技术中常见问题汇总

实时定量PCR技术中常见问题汇总实时定量PCR技术（real-timePCR）也叫qPCR（QuantitavePCR），是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过特定数学原理对未知模板进行定量分析的方法。它是一项临床上非常成熟的技术，目前在分子生物学领域，qPCR核酸定量的主要方法。目前仍在全球肆虐的病毒鉴定的“金标准”——核酸检测就是通过qPCR原理进行的。那么拿到一个样本，需要经过以下多项操作流程才能定量检测到它的核酸含量。其中...

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使用生物反应器研究乳腺癌亚型细胞外囊泡产生技术

使用生物反应器研究乳腺癌亚型细胞外囊泡产生技术使用传统体外方法生产的EV的深入表征和验证由于需要大面积的细胞单层和大量的培养基，培养可能具有挑战性。该实验方法使用贴壁细胞生物反应器系统以节省空间、资源和时间的方式同时培养多种不同亚型的乳腺癌细胞系，从而能够持续生产大量用于下游实验的EV。一、生物反应器接种、适应和维护培养基A：含有10%胎牛血清（FBS，Merck）和1%青霉素/链霉素（PS，Gibco）的DMEM（Gibco）。培养基B：AdvancedDMEM/F-12(...

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细胞培养常见问题汇总

细胞培养常见问题汇总1冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。2细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解冻后...

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层析工艺放大需要遵循的原则

层析工艺放大原则包括线性放大原则和固定保留时间原则。线性放大原则线性放大原则是工艺放大过程中常用的原则，其核心思路是保持层析柱柱高和线性流速不变，只放大层析柱直径和体积流速。固定的柱高和线性流速理论上可以保证相同的保留时间、层析中溶液用到的CV数和洗脱样品CV数，较大程度保证相同的纯化效果。线性放大原则的具体操作方法可参见下表：层析工艺在实际的应用过程中，线性放大可能会遇到几个问题，一是层析设备供应商提供的层析柱都是几个固定规格，可能无法适配具体某项的工艺需求；二是当层析柱直...

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